黃姜(Dioscorea zingiberensis),又名盾狀葉薯蕷,俗名火頭根,薯蕷科薯蕷屬的野生植物,其根狀莖內有高含量的薯蕷皂素,是迄今為止所發(fā)現的皂素含量高的植物藥源種之一。皂素是合成甾體類(lèi)激素藥物的重要原料,具有消炎、避孕、鎮痛、麻醉、殺蟲(chóng)等功效,在醫藥上應用十分廣泛,其需要量 大。
因為他是雌雄異株,有性繁殖會(huì )導致后代性狀發(fā)生變異,其無(wú)性繁殖可以保持后代性狀的穩定,但年繁殖率僅為3~6倍,且生產(chǎn)中發(fā)現了種性退化、皂素含量不穩定、季節性強及用種量大等情況,不能快速推廣黃姜的優(yōu)良單株或品種。組織培養技術(shù)是快速繁殖黃姜優(yōu)良單株的有效方法,對優(yōu)良品種能提純復壯和快速育苗。
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材料的選取與接種
從盆栽于室內的(室外的污染極高,須經(jīng)催芽后選取)生長(cháng)旺盛的植株上剪下新發(fā)出的頂芽或嫩莖段,用中性洗滌劑浸泡,并不斷搖動(dòng),然后用自來(lái)水沖洗數遍,再用蒸餾水洗2遍后,以0.01%高錳酸鉀滅菌10min,無(wú)菌水沖洗1遍;然后在超凈工作臺上用0.1%HgCl2滅菌4min,無(wú)菌水洗4遍,以無(wú)菌濾紙吸干水后,用剪刀剪成0.5cm的莖段(每段都帶一個(gè)芽或頂芽)接種在誘導培養基:MS+6-BA 2.0mg/L+IAA 0.2mg/L上。培養溫度26—28oC,光照10h/d,光照度2000LX。
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誘導與增值
接種在誘導培養基上的外植體,20d以后從原來(lái)的腋芽處開(kāi)始長(cháng)出1—2個(gè)小芽,底部長(cháng)出褐色愈傷組織。約20d后,新長(cháng)出的芽長(cháng)至2-3個(gè)葉芽的小苗,底部的愈傷組織長(cháng)成小球形,成為底部帶愈傷組織的小苗,即可轉入壯苗培養基:MS+NAA 5.0mg/L+6-BA0.5mg/L上培養。也可以把小苗的頂芽剪下繼續接種在誘導培養基上,讓其再誘導芽和愈傷組織??梢詫⒂鷤M織接于MS+KT0.2mg/L+2,4-D 4.0mg/L培養基上,經(jīng)過(guò)40d后長(cháng)出2-3個(gè)芽。半個(gè)月以后便長(cháng)出2-3棵小苗,然后將小苗剪成單株,接在壯苗培養基上培養。
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生根與移栽
壯苗培養基上的苗高3—4cm時(shí)轉入生根培養基上,生根培養基以:MS+6-BA 0.2mg/L+NAA 2.0mg/L為宜,1個(gè)月后長(cháng)出4-5條根。將生根的苗打開(kāi)封口膜在室內煉苗2—3d,小心取出苗,洗凈培養基栽入沙中,少澆水,但也不能過(guò)干。精心管理,成活率可達70%。待根部長(cháng)出塊莖后再轉入大田栽培。
編者按:本文來(lái)自胡孔峰,胡如善,張慎舉主編《植物組織培養技術(shù)及應用》,河南科學(xué)技術(shù)出版社,由小編整理發(fā)布,如有不妥,敬請告知!
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